期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
新生鼠股骨破骨细胞存在位置的确定及其噬骨能力验证
王正东；颜南；李文海；马骊
关键词：巨核细胞, 破骨细胞, 细胞培养技术, 组织构建
摘要：目的:确定新生鼠体内破骨细胞的存在位置,观察分离纯化后的破骨细胞形态结构,并检测其噬骨能力.方法:实验于2006-07/11在沈阳医学院中心实验室完成.①市售新鲜成年牛股骨皮质,临用前锯成1 cm宽条,磨片机磨成厚50 μm的1 cm×1 cm骨片,乙醇浸泡,晾干,紫外线照射消毒骨片的两面,放于DMEM培养基中4℃备用.②选取新生大鼠10只,处死取其后肢股骨,于中间位置截成两段,多聚甲醛固定,甲苯胺蓝染色确定体内破骨细胞的存在位置,并进行形态结构观察.③另选取新生大鼠6只,处死取其四肢长骨,刮取骨髓腔内及干骺端表面直至骨干成为极微小的碎片,机械分离破骨细胞,胰蛋白酶+乙二胺四乙酸联合消化.④吉姆莎染色观察细胞形态结构,抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞酶活性,扫描电镜观察破骨细胞形态结构,通过破骨细胞在骨片上的陷凹情况验证噬骨能力.结果:①鼠后肢股骨行甲苯胺兰染色,大量破骨细胞位于靠近干骺端骨小粱的骨陷凹中,核呈深蓝色,核大且多.②分离培养的破骨细胞数量较少,体积大,胞浆丰满,细胞突起延展,细胞核呈圆形或椭圆形,积聚在细胞中央或排列在细胞周边.胰蛋白酶+乙二胺四乙酸联合消化后可使混杂的单核基质细胞脱落,培养皿上大部分为多核巨细胞,破骨细胞纯化率达80%.③抗酒石酸酸性磷酸酶染色后的破骨细胞呈阳性表达,胞质内酶活性部位为红橙色.④成熟破骨细胞体积大,细胞突起延展,细胞周围出现伪足.破骨细胞在牛皮质骨片上培养时产生骨陷凹,吸收陷窝大部分呈梅花瓣形或腊肠形.结论:新生鼠体内破骨细胞多位于靠近干骺端骨小粱的骨陷凹中,具有噬骨能力,可使牛皮质骨片产生骨陷凹.为体外分析破骨细胞生物特性、骨吸收功能及骨组织工程应用提供丰富的细胞来源.
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