期刊简介

               《中国组织工程研究与临床康复》(原《中国临床康复》)杂志系卫生部主管,中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准,《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》,变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R,ISSN 1673-8225,国内外公开发行,发行代号8-584,周刊,200页/期,A4开本。    更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址:www.crter.org                

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  • 杂志名称:中国组织工程研究杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
  • 国际刊号:2095-4344
  • 国内刊号:21-1581/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:百种中国杰出学术期刊期刊收录:维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
中国组织工程研究杂志2017年第33期

基底样型乳腺癌肿瘤干/祖细胞的长时程无血清培养

董华英;王伟;陈元文;包俊杰;陈鑫;吴诚义

关键词:干细胞, 肿瘤干细胞, 乳腺癌, 分子分型, 新辅助化疗, 细胞培养
摘要:背景:乳腺癌干细胞是乳腺癌细胞中的亚群,具有类似干细胞的自我更新和多系分化潜能,具有放化疗和缺氧抵抗性、高致瘤性和高侵袭转移性等特征,在乳腺癌的发生发展以及复发转移中发挥重要作用.乳腺癌干细胞学说在一定程度上阐明了乳腺癌的发病机制,在治疗方案选择、新的治疗靶点的发现和乳腺癌预后的判断等方面有很大的应用价值.目的:从基底样型乳腺癌组织中分离培养肿瘤干/祖细胞,并通过无血清悬浮技术长时程培养,研究其自我更新能力、分化潜能和细胞表型等生物学特性.方法:20例基底样型乳腺癌患者,其中10例患者未经过任何治疗,另外10例患者术前均行新辅助化疗(≥4周期),术前于肿瘤边缘切取1 cm3新鲜肿瘤组织,立即送实验室,经机械分离后获取肿瘤细胞.应用无血清悬浮培养技术富集乳腺癌干/祖细胞微球体后,通过单克隆实验检测乳腺癌干/祖细胞微球体细胞的克隆形成和自我更新能力,在添加血清的培养液中诱导乳腺癌干/祖细胞微球体细胞分化,观察其分化能力.通过流式细胞术检测CD44+/CD24-和ALDH1+表型细胞的比例.结果与结论:①在含生长因子的无血清培养基中,未行新辅助化疗的基底样型乳腺癌细胞均可生成乳腺癌干/祖细胞微球体,而大部分新辅助化疗后的乳腺癌组织中可直接分离获得微球体样的细胞团;②乳腺癌干/祖细胞微球体细胞可连续传代形成新生的乳腺癌干/祖细胞微球体,随着培养传代次数的增加,贴壁细胞逐渐增多,新产生的乳腺癌干/祖细胞微球体数量逐渐减少,球体直径变小,且乳腺癌干/祖细胞微球体也更加容易贴壁.乳腺癌干/祖细胞微球体细胞在添加血清的培养基中培养可贴壁分化;③乳腺癌干/祖细胞微球体中富集了CD44+/CD24-和ALDH1+表型细胞,诱导分化后两种表型细胞的含量大幅下降或缺失;④大部分化疗后的乳腺癌干/祖细胞微球体细胞具有更强的自我更新和分化潜能,含有更高比例的CD44+/CD24-和ALDH1+表型细胞;⑤结果表明,基底样型乳腺癌组织中存在具有自我更新和多向分化等干/祖细胞样特性的肿瘤细胞,新辅助化疗可富集乳腺癌干/祖细胞形成微球体样细胞团.不同标本来源的乳腺癌干/祖细胞生物学行为存在一定差异,其可随环境因素的作用而变化.