期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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首页>中国组织工程研究杂志
- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
Nanog慢病毒载体构建及在胚胎干细胞分化调控中的应用
陈霏；万利；李艳；李欣
关键词：干细胞, 胚胎干细胞, 慢病毒, GATEWAY技术, NANOG, 国家自然科学基金
摘要：背景：在胚胎干细胞分化调控研究中，仍缺少安全有效的组织特异性启动子介导的荧光报告基因的慢病毒表达载体。目的：构建一个表达多能干细胞组织特异性启动子Nanog同时携带荧光报告基因和抗生素筛选基因的慢病毒表达载体Puro-Nanog-hrGFP，建立小鼠胚胎干细胞转基因细胞系，并观察其在小鼠胚胎干细胞细胞诱导分化过程中的表达。方法：利用 PCR 扩增 Nanog 基因，通过 LR 反应连接荧光报告基因 hrGFP 构建慢病毒表达载体Puro-Nanog-hrGFP。慢病毒包装并转导小鼠胚胎干细胞后运用嘌呤霉素筛选得到小鼠胚胎干细胞转基因细胞系并进行鉴定，然后诱导其分化，观察随着小鼠胚胎干细胞的分化Nanog的表达情况。结果与结论：通过特定引物PCR鉴定证实，慢病毒表达载体Nanog-hrGFP构建成功，将其成功导入小鼠胚胎干细胞，经筛纯化得到表达绿色荧光的小鼠胚胎干细胞单克隆细胞系，并通过诱导其分化可观察到绿色荧光表达逐渐减弱，可为进一步调控干细胞分化奠定基础。
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