期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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首页>中国组织工程研究杂志
- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
构建肿瘤坏死因子α刺激基因6慢病毒表达及干扰载体及对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖与凋亡的影响
陈钊；李小静；王晖
关键词：组织构建, 组织工程, 瘢痕, 成纤维细胞, RNA干扰, 过表达, 慢病毒, TSG-6基因, 增殖, 凋亡, 国家自然科学基金
摘要：背景：研究表明，肿瘤坏死因子α刺激基因6(tumor necrosis factorαstimulated gene 6，TSG-6)具有抗炎作用，早期创面局部注射TSG-6蛋白可抑制瘢痕形成，但其参与瘢痕形成的机制尚不明确。目的：构建人TSG-6重组慢病毒表达载体与干扰载体，建立稳定转染的过表达及干扰细胞株，观察TSG-6对瘢痕疙瘩成纤维细胞株增殖与凋亡的影响。方法：采用酶消化法分离纯化得到人瘢痕疙瘩成纤维细胞，再以免疫组织化学法鉴定。构建pLVX-puro-TSG-6及pLVX-shRNA1-TSG-6重组慢病毒载体，感染人瘢痕疙瘩成纤维细胞，并行RT-PCR和Western blot检验各组细胞中TSG-6的表达。用MTT法和流式细胞术检测转染后不同时间段内各组细胞增殖和凋亡情况。用Western blot检测各组细胞中Bcl-2、P53及Active-caspase-3的表达。结果与结论：①成功分离原代人瘢痕疙瘩成纤维细胞，光学显微镜下细胞多呈梭形，传至5代后行波形蛋白的免疫组织化学染色，阳性率为100%，细胞角蛋白染色阴性；②重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功，细胞中TSG-6的表达发生明显变化。与对照组相比，TSG-6过表达组细胞增殖减缓，凋亡率显著升高，TSG-6干扰组细胞增殖加快，细胞凋亡率降低(P<0.05)；③Western blot结果显示， TSG-6过表达组Bcl-2表达显著降低，P53及Active-caspase-3明显上升(P<0.05)；④结果表明，TSG-6对瘢痕疙瘩成纤维细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用，且其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调P53蛋白表达、升高Caspase-3活性有关。
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