期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
全骨髓贴壁接触培养SD大鼠骨髓间充质干细胞
宫宇；王鸿飞；夏海军
关键词：干细胞, 骨髓干细胞, 骨髓间充质干细胞, SD大鼠, 分离, 培养, 贴壁法, 诱导分化
摘要：背景：体外分离培养出生长状态好、高纯度、增殖能力强和数量充足的大鼠骨髓间充质干细胞，是将其作为种子细胞用于组织和细胞移植的重要前提。目的：建立简便、快速、有效的SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养方法，并观察其生物学特性。方法：采用全骨髓法将 SD 大鼠双侧股骨和胫骨骨髓细胞进行体外分离培养，贴壁接种法进行细胞纯化、传代。观察细胞生长形态及特征，绘制细胞生长曲线，检测细胞表面标记物，采用体外诱导剂诱导细胞分别向成骨、成软骨、成脂方向分化。结果与结论：全骨髓贴壁接种法分离培养的骨髓间充质干细胞生长旺盛、纯度高，细胞生长形态呈长梭形，极性排列，细胞生长呈S形生长曲线，群体倍增时间为29 h，细胞在连续传10代后仍具有较强的增殖能力。第3代骨髓间充质干细胞的表面标记物CD44、CD29、CD90均呈阳性表达，CD45、CD34、CD11b则呈阴性表达。第3代骨髓间充质干细胞分别经成骨、成软骨、成脂诱导剂诱导后，茜素红染色、碱性磷酸酶染色、von-kossa矿化结节染色、甲苯胺蓝染色和油红O染色均呈阳性。结果验证全骨髓贴壁接种法是一种简便可靠的体外分离培养方法，能获得纯度较高的骨髓间充质干细胞，经实验鉴定第3代骨髓间充质干细胞生物活性佳，且具有多向诱导分化能力，适合作为后续实验的种子细胞。
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