期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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首页>中国组织工程研究杂志
- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
柯萨奇病毒B3VP1重组腺病毒载体疫苗rAd/VP22-L-VP1的构建及表达
李剑；刘贵霞；米立国；蓝佳明；张永红；金玉怀
关键词：柯萨奇病毒B3, 腺病毒载体, 基因疫苗, 单纯疱疹病毒1, 型VP22, 佐剂, 组织工程
摘要：背景:VP22 是单纯疱疹病毒1 型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)UL49 基因编码的碱性蛋白质,具有蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD),能够把与之融合的蛋白或与之结合的DNA 等大分子跨膜送递到邻近细胞,在基因靶向预防中表现出优势.目的:构建表达单纯疱疹病毒1 型VP22 与柯萨奇病毒B3 主要中和抗原VP1 融合蛋白的重组腺病毒载体疫苗,观察外源基因在HEK293 细胞中的良好表达.方法:PCR法扩增目的基因HSV-1 VP22 和CVB3 VP1,经Linker 连接,将VP22-L-VP1 插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,构建重组穿梭质粒AdTrack-CMV/VP22-L-VP1.再将此载体与腺病毒骨架载体pAdEasy-1 在大肠杆菌BJ5183 中进行同源重组,生成重组腺病毒质粒pAd/VP22-L-VP1,脂质体介导pAd/VP22-L-VP1 转染HEK293 细胞包装重组腺病毒rAd/VP22-L-VP1.HEK293 细胞上进行病毒扩增和滴定并检测外源基因的表达.结果与结论:构建的重组腺病毒载体pAd/VP22-L-VP1 经过第4 轮扩增,其滴度达到6.77×107 pfu/mL,体外感染293 细胞可见VP22 和VP1 融合蛋白的表达.说明实验成功构建并包装重组腺病毒rAd/VP22-L-VP1.
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