期刊简介

               《中国组织工程研究与临床康复》(原《中国临床康复》)杂志系卫生部主管,中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准,《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》,变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R,ISSN 1673-8225,国内外公开发行,发行代号8-584,周刊,200页/期,A4开本。    更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址:www.crter.org                

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  • 杂志名称:中国组织工程研究杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
  • 国际刊号:2095-4344
  • 国内刊号:21-1581/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:百种中国杰出学术期刊期刊收录:维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
中国组织工程研究杂志2007年第12期

分离纯化牛嗜铬细胞方法改进

雄鹰;张晓慧;梁丰;郭昕;王为;马小军

关键词:肾上腺髓质/细胞学, 嗜铬颗粒, 细胞分离
摘要:目的:建立一种稳定、经济、简单的牛肾上腺髓质嗜铬细胞体外分离、纯化方法,为临床移植提供充足、健康的细胞来源.方法:实验于2004-01/2005-12在中科院大连化学物理研究所生物医学材料工程组实验室完成.将胶原酶消化法和机械分离法结合,分离新生牛嗜铬细胞;采用Percoll非连续密度梯度离心法纯化新生牛嗜铬细胞.采用相差显微镜观察牛嗜铬细胞形态,椎虫蓝排斥染色观察牛嗜铬细胞活性,组织化学染色鉴定牛嗜铬细胞属性和纯度,免疫组化染色观察牛嗜铬细胞的功能活性.结果:①健康的牛嗜铬细胞集中在一定密度的两层分离介质之间,红细胞完全沉降于离心管底部,而皮质细胞和细胞碎屑则分散在特定密度的分离介质中.②平均每个牛肾上腺可分离得到(0.7~3.1)×108个牛嗜铬细胞.③将分离得到的牛嗜铬细胞进行椎虫蓝排斥染色,显示新鲜分离的牛嗜铬细胞存活率大于99%,具有合成儿茶酚胺的功能活性.结论:机械分离结合胶原酶灌注消化法分离牛嗜铬细胞后,经Percoll非连续等密度梯度离心可以有效纯化牛嗜铬细胞,分离的细胞数量多,纯度高,有合成儿茶酚胺的功能活性.