期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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首页>中国组织工程研究杂志
- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
高强度聚焦超声制备肿瘤抗原致敏树突状细胞
邹玉红；崔志芳；韩秋霞；闫华晓；叶欣
关键词：树突状细胞, 高强度聚焦超声, 肿瘤抗原, 干扰素-γ
摘要：目的:探讨用高强度聚焦超声辐照肿瘤细胞制备肿瘤抗原致敏树突状细胞的可行性,为高强度聚焦超声开辟新的应用领域.方法:实验于2004-01/2005-04在泰安市中心医院中心实验室完成.①实验材料:BALB/C清洁级小鼠20只.CT-26肿瘤细胞为BALB/C小鼠来源的结肠癌细胞,由解放军第二军医大学免疫学研究所惠赠.②实验方法:应用白细胞介素4+粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子联合诱导培养小鼠骨髓细胞.设立4组:高强度聚焦超声辐照组将CT-26细胞置于含10%小牛血清的RPMI1640培养液中,进入对数生长期后调整细胞浓度为5×109 L-1,采用1 000 W/cm2×30 s剂量辐照CT-26细胞,离心,取上清过滤除菌.冻融组将CT-26细胞调整浓度至5×109 L-1,-80℃冷冻,35℃水浴复温,循环4次,裂解离心,取上清过滤除菌.单纯CT-26细胞组将CT-26细胞调整浓度至5×109 L-1,细胞不经其他任何处理.空白对照组将树突状细胞与抗原按1∶10接种,培养4～6 h.从小鼠脾脏制备脾细胞,分离纯化T细胞,调整浓度至2×109 L-1,T细胞与上述4组负载的树突状细胞按20∶1接种,培养基中加入白细胞介素2,共孵育48 h.③实验评估:对扩增培养的树突状细胞首先进行形态学观察,再采用流式细胞仪分析细胞表型.锥虫蓝染色观察高强度聚焦超声辐照后CT-26细胞拒染率和形态学变化.ELISA法检测各组致敏树突状细胞诱导T细胞分泌白细胞介素12及干扰素-γ的含量.结果:①骨髓源性树突状细胞形态及细胞表面表型分析:体外培养小鼠骨髓细胞6～8 d,细胞表面出现较多毛刺样突起,拉长,为典型的树突状细胞特征.流式细胞仪检测树突状细胞表面分子CD80、CD86、H-2Kd及I-Ad呈高表达.②高强度聚焦超声辐照后细胞拒染率和形态学的变化:超声辐照剂量为1 000W/cm2×30 s时,无细胞存活,完全失去细胞形态,全部被撕裂成碎片.③致敏树突状细胞诱导T细胞分泌细胞因子情况:与空白对照组比较,高强度聚焦超声辐照组、冻融组、单纯CT-26细胞组分泌的白细胞介素12及干扰素-γ含量均明显升高(P均＜0.05);且高强度聚焦超声辐照组、冻融组升高幅度大于单纯CT-26细胞组,但此两组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:高强度聚焦超声能使肿瘤细胞灭活、破碎,其制备的肿瘤抗原可体外致敏树突状细胞,并使树突状细胞分泌白细胞介素12,诱导T细胞分泌干扰素-γ.
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