期刊简介
《中国组织工程研究与临床康复》（原《中国临床康复》）杂志系卫生部主管，中国康复医学会、《中国组织工程研究与临床康复》杂志社主办的国家级学术期刊。经新出报刊[2006]288号批准，《中国临床康复》更名为《中国组织工程研究与临床康复》，变更后国内统一连续出版物号为CN 21-1539/R，ISSN 1673-8225，国内外公开发行，发行代号8-584，周刊，200页/期，A4开本。 更名后的《中国组织工程研究与临床康复》推出2009年的全新策划,年出版53期,各周刊征稿重点邀您参与,请您评估。网址：www.crter.org
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- 杂志名称：中国组织工程研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 国际刊号：2095-4344
- 国内刊号：21-1581/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：百种中国杰出学术期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, 万方收录(中)
神经细胞黏附分子L1-Ig(1-4)的原核表达及其功能
魏海峰；肖建如；张琪；杨兴海；马俊明；贾连顺；李家顺
关键词：神经细胞粘附分子类, 基因扩增, 基因表达
摘要：目的:利用基因克隆、表达、纯化等分子生物学手段获取具有生物活性的神经细胞黏附分子L1(L1)的Ig(1-4)结构域融合蛋白.方法:实验于2001-10/2004-12在解放军第二军医大学神经生物教研室完成.①从新生4 d的SD大鼠的海马组织中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链反应法获取L1-Ig(1-4)基因,进行序列分析后构建表达载体pET28a(+)-L1-Ig(1-4).②转染大肠杆菌BL21,用IPTG诱导L1-Ig(1-4)的表达.③利用Ni2+-NTA柱纯化和复性.④用L1-Ig(1-4)融合蛋白观察培养脊髓原代神经元轴突生长情况及其活性,未加入融合蛋白的细胞做对照.结果:①克隆出编码正确的大鼠L1-Ig(1-4)基因.②并在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物占全菌总蛋白的28.3%.③Ni2+-NTA柱纯化后的纯度达90%以上.④加入融合蛋白后脊髓神经元突触的生长能力较未加入融合蛋白的细胞增强[(56±3.8),(43±2.7)μm,P＜0.01].结论:通过原核表达可大量获得L1-Ig(1-4)融合蛋白,该融合蛋白同样具有促神经生长的生物学活性.
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