氯化两面针碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

摘要：背景:研究表明,自由基增多致脂质过氧化是缺血再灌注损伤的主要因素.性味苦辛平,有行气止痛、活血化瘀、祛风通络功用的芸香科植物两面针提取物有抗氧化作用.目的:观察氯化两面针碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用,并分析其作用途径.设计:随机对照实验.单位:广西医科大学药理学教研室和化学教研室.材料:选用健康Wistar大鼠60只,雌雄各半,体质量250～300 g.氯化两面针碱(广西医科大学化学教研室提供,批号:20050609).MS4000U生物信号定量记录分析系统(广州市龙飞达科技有限公司).日立7170A型全自动生化分析仪.722 N可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司).盐酸维拉帕米(上海禾丰制药有限公司,批号:020701,2mL/支).丙二醛、超氧化物歧化酶测定试剂盒(南京建成生物工程研究所产品).方法:实验于2004-06/2006-05在广西医科大学药理学教研室和化学教研室完成.①将心电图正常大鼠60只分性别按随机数字表法分为6组:假手术组,模型组,氯化两面针碱2,1,0.5 mg/kg 3个剂量组,阳性对照组,每组10只,雌雄各半.假手术组:穿线不结扎,90 min后结束实验;其余50只大鼠:结扎冠状动脉左前降支缺血30 min,再灌注60 min.阳性对照组、不同剂量氯化两面针碱组、模型组:在结扎冠状动脉左前降支前10 min经股静脉分别注射维拉帕米2 mg/kg,氯化两面针碱2,l,0.5 mg/kg,5 mL/kg,等体积生理盐水.②再灌注的同时用标准肢体Ⅱ导联心电图连续监测,记录60min内各组心律失常类型、发生率及持续时间;并记录再灌注15 min及60min ST段的变化.③实验完毕,采用全自动生化分析仪检测血清心肌酶学指标.分别用硫代巴比妥酸法与黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织丙二醛含量及超氧化物歧化酶活力.④两组间计量和计数资料差异比较采用t检验和χ2检验.主要观察指标:各组大鼠心律失常发生情况、心电图ST段抬高程度、血清心肌酶学指标变化和心肌组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶活力比较. 结果:大鼠60只均进入结果分析.①大鼠心律失常及心电图ST段抬高程度变化:1和2 mg/kg氯化两面针碱组大鼠心律失常出现的时间明显迟于模型组(P＜0.05,0.01).1和2 mg/kg氯化两面针碱组和阳性对照组大鼠心律失常持续时间明显短于模型组(P＜0.05～0.01),各类型心律失常发生率明显少于模型组(P＜0.01),再灌注15和60min时ST段抬高程度均明显低于模型组(P＜0.05～0.01).②血清心肌酶水平:模型组心肌缺血再灌注60min后明显高于假手术组(P＜0.01),1和2 mg/kg氯化两面针碱组明显低于模型组(P＜0.01,＜0.05),且随氯化两面针碱剂量增加,下降幅度增加.阳性对照组明显低于模型组(P＜0.05～0.01).③心肌组织超氧化物歧化酶活力:模型组心肌缺血再灌注60 min后明显低于假手术组(P＜0.01);1和2mg/kg氯化两面针碱组明显高于模型组(P＜0.01),且随氯化两面针碱增加,上升幅度增加.④心肌组织丙二醛含量:模型组心肌缺血再灌注60min后明显高于假手术组(P＜0.01).1和2 mg/kg氯化两面针碱组明显低于模型组(P＜0.01),且随氯化两面针碱增加,下降幅度增加;阳性对照组明显低于模型组(P＜0.05).结论:①1和2 mg/kg氯化两面针碱能降低心肌缺血再灌注大鼠心律失常的发生率,推迟心律失常的发生时间并缩短其持续时间,降低再灌注15和60min时ST段抬高程度;该作用效果与维拉帕米相当.②1和2 mg/kg氯化两面针碱能减少心肌缺血再灌注大鼠心肌酶的释放,减轻氧自由基损伤程度,起到保护大鼠缺血再灌注心肌细胞损伤的作用,且该作用呈一定的剂量依赖性.